鱟試驗法的反應(yīng)機(jī)理簡介

鱟試驗法也稱為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，英文Bacterial Endotoxin test，系列用革蘭氏陰性菌所產(chǎn)生的內(nèi)毒素與TAL或LAL試劑發(fā)生反應(yīng)，根據(jù)所形成的凝膠化反應(yīng)，從而定性或定量檢測細(xì)菌內(nèi)毒素的一種體外分析方法。

有關(guān)細(xì)菌內(nèi)毒素與LAL試劑或TAL試劑的反應(yīng)機(jī)理研究，雖然在研究鱟血凝集反應(yīng)的初期，leven and Bang就已經(jīng)初步闡明了凝集反應(yīng)的機(jī)理；但進(jìn)一步從分子水平上的研究工作，一直到70年代后期才逐漸被闡明。鱟試驗?zāi)磻?yīng)的機(jī)理如下圖所示：

即鱟血變形細(xì)胞裂解物中含有能被內(nèi)毒素激活的凝固系統(tǒng)，主要有凝固酶原，C因子、B因子與凝固蛋白原等，內(nèi)毒素激活C因子，活化的C因子又激活B因子（C因子系），或由1,3）-β-D-葡聚糖激活G因子（G因子系）接著激活的B因子或激活的G因子，再去激活凝固酶原，使其轉(zhuǎn)變成活化的凝固酶，該酶切斷凝固蛋白原中特定位置的精氨肽鏈，形成凝固蛋白產(chǎn)生凝膠。關(guān)于G因子系能否單獨(dú)成立，目前在各國存在分歧，凝固酶除能水解凝固蛋白原使之變成凝固蛋白而發(fā)生凝固外，它還對外加的鱟三肽有去胺酶活性使硝基苯胺(pNA)游離，而發(fā)生呈色反應(yīng)。