如何有效去除內(nèi)毒素？

目前，解決如何去除內(nèi)毒素的問(wèn)題刻不容緩，那如何有效去除內(nèi)毒素呢？

首先，在藥品制劑及基因工程等產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程去除內(nèi)毒素包含兩方面的內(nèi)容：在藥品制造過(guò)程中或在基因工程產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中所需的各類(lèi)藥品以及水等一切儀器和試劑都不能有內(nèi)毒素存在，甚至要檢查每一個(gè)環(huán)節(jié)中的個(gè)別藥品試劑的內(nèi)毒素含量，若發(fā)現(xiàn)有超量或較大量?jī)?nèi)毒素存在時(shí)，必須要把內(nèi)毒素去除，然后再進(jìn)行下一步制造程序。去除內(nèi)毒素的方法要根據(jù)各類(lèi)藥物的相對(duì)分子質(zhì)量等應(yīng)用各種相應(yīng)有效的方法予以去除。選擇去除內(nèi)毒素的方法十分重要。

總之，要求研究既能有效去除內(nèi)毒素又能最大限度地保持生物大分子活性的方法是十分重要的。一般需根據(jù)具體要求選擇去除內(nèi)毒素的方法，例如基因工程產(chǎn)品的純化即主要采用各種分析技術(shù)如離子交換、親和層析、分子篩等有效去除內(nèi)毒素。

離子交換是利用樣液中各種物質(zhì)在同一環(huán)境中所帶電荷的不同而加以交換分離的，當(dāng)pH值＞2時(shí)內(nèi)毒素帶負(fù)電荷，這是離子交換法去除內(nèi)毒素的基礎(chǔ)。應(yīng)用層析法從白蛋白中去除內(nèi)毒素的工藝主要是采用DEAE-SepharoseF介質(zhì)，即將被內(nèi)毒素污染的白蛋白上柱，使白蛋白和大部分內(nèi)毒素結(jié)合于介質(zhì)上，先用水清洗清除少部分不結(jié)合的內(nèi)毒素，然后用特殊洗脫液選擇性洗脫白蛋白，此洗脫液對(duì)內(nèi)毒素?zé)o作用，因此90%的內(nèi)毒素仍結(jié)合在柱上，最后用NaOH將柱清洗干凈。用此法每批可以處理20kg白蛋白，可清除內(nèi)毒素含量達(dá)20μg/L。

其次，即使生產(chǎn)中采取了有效的工藝和嚴(yán)格的預(yù)防措施，仍有可能在藥品制造及分裝中污染內(nèi)毒素，如何處理已被污染的半成品是比較棘手的問(wèn)題。

最后，人們要解決的是臨床上的內(nèi)毒素血癥問(wèn)題，即怎樣有效地把血液中的內(nèi)毒素去除。目前較為有效的處理方法是采用親和層析技術(shù)，即將內(nèi)毒素底物LAL或多黏菌素B（PMB）以及其他有效的、特異性較強(qiáng)的物質(zhì)偶聯(lián)于載體（CNB-Scellulose或中孔纖維）上，用介質(zhì)的特異性吸附內(nèi)毒素，從而使蛋白通過(guò)，把內(nèi)毒素吸附住。

Kutg介紹了PMB處理凝膠的制作，他利用PMB凝膠柱從含1~10mg/L內(nèi)毒素的溶液中將內(nèi)毒素充分除凈，但未能明確介質(zhì)的吸附量。美國(guó)Sterogene生物分離公司的Acticlean Etox凝膠的最大內(nèi)毒素結(jié)合量在血清中為2000EU/ml，在水中為20000EU/ml，用這種膠處理被污染的含白蛋白的干擾素，可吸附內(nèi)毒素量為1700EU/ml，去除內(nèi)毒素效果較好，但活性有一定損失。

目前需要解決的是蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合的問(wèn)題，如果內(nèi)毒素在蛋白溶液中以游離形式存在，上述方法是有效的；如果內(nèi)毒素與目標(biāo)蛋白結(jié)合在一起，則Thomas報(bào)道的選用透析的表面活性劑辛烷-B-D-吡喃甙葡糖可使內(nèi)毒素與蛋白解離，之后再使用PMB-Sepharose 4B親和層析法，用這種方法處理已被內(nèi)毒素污染的牛過(guò)氧化物酶是有一定效果的。

國(guó)內(nèi)張順財(cái)?shù)葓?bào)道應(yīng)用多黏菌素B脂親和層析法清除體液中的內(nèi)毒素的結(jié)果表明：5ml多黏菌素B親和層析柱吸附內(nèi)毒素的總量為450μg，應(yīng)用此法對(duì)血清及腹水中的內(nèi)毒素有明顯的吸附作用，而血清中的有效成分則無(wú)明顯改變，且柱的復(fù)活率可達(dá)85%。